早孕试纸可以晚上用，只要尿中的HCG含量达到一定浓度，即可检测出。但因晨尿有一定浓缩，用于检测，效果更佳。

人体在怀孕后由妊娠滋养细胞分泌一种特殊的激素，即绒毛膜促性腺激素（HCG），一般情况下非孕期此激素在体内微乎其微（某些特殊肿瘤或疾病除外）。通过检测妊娠体内是否含有此激素来判断是否妊娠。因为此激素可随尿液排出，故早孕试纸采用检测尿液中是否HCG来判断妊娠与否。

妊娠后，只要尿中的HCG达到一定的含量，一般50-100mIU/ml左右甚至更低，最低可达25mIU/ml，即可检测出，所以晚上使用也可以，一般情况下不会影响其结果。若使用晨尿，由于尿液有一定的浓缩，检出率可能略高，效果更佳。

不同的检测手段灵敏度不一样，早孕试纸检测存在假阳性或假阴性。